Амплификаторы с детекцией в режиме реального времени
Представлено 32 товара
Для осуществления полимеразной цепной реакции лаборатории требуется специальное оборудование – амплификатор. С его помощью можно «скопировать» образец ДНК. Полимеразная цепная реакция увеличивает количество отобранных биологических фрагментов более чем в 100 раз путем 20-40 повторений реакции в определенных условиях внутри лабораторного прибора. С каждой интеграцией ПЦР количество скопированных фрагментов растет в геометрической прогрессии.
Амплификаторы обеспечивают нагревание, последующее охлаждение фрагмента ДНК для его успешного «копирования». Эти приборы для исследований во многом работают по принципу термостатов. Для правильного проведения ПЦР важно поддерживать определенную температуру, обеспечить цикличную последовательность процесса. Эти параметры работы лабораторного оборудования являются главными при проведении полимеразной цепной реакции.
Принцип работы амплификаторов
ПЦР в режиме реального времени стал ключевым инструментом в биологических исследованиях для качественного и количественного анализа ДНК или РНК. Амплификаторы широко применяются в различных областях, таких как анализ экспрессии генов, генотипирование SNP, исследование генной копии, обнаружение патогенов, анализ белковых комплексов на основе тепловой денатурации, профилирование микроРНК и т.д. Использование ПЦР позволяет обнаружить двукратную разницу в числе копий ДНК. Однако, достижение пределов обнаружения qPCR может быть сложно для таких экспериментов, как обнаружение редких мутаций при наличии большого количества штаммов, определение небольших различий в концентрации целевой ДНК и т.д. В таких случаях более предпочтительным может быть использование цифровой ПЦР “реального времени”.
Процесс основан на многократном нагревании биологического образца и его последующем охлаждении с соблюдением точных циклов, постоянном поддержании определенной температурного режима внутри прибора. ПЦР пройдет успешно только в случае корректно зацикленных итераций, иначе «копирование» ДНК будет выполнено неверно.
Циклы амплификации ДНК включают несколько этапов:
- Денатурация. Водородные связи между двухцепочечными молекулами ДНК образца разрушаются, они становятся одноцепочечными. Для денатурации прибор нагревается до 94-98 градусов;
- Подсоединение праймеров. Праймеры – это специальные короткие участки ДНК, подготовленные для проведения реакции. Праймеры дополняют обрабатываемые цепочки, стимулируя процесс синтеза. Процесс идет со снижением градусов внутри прибора до 40-75 градусов;
- Элонгация. На последнем этапе происходит синтез новой ДНК-цепочки в диапазоне от 60 до 75 градусов.
Соблюдение точных температурных параметров очень важно для проведения ПЦР, так как ошибка на любом этапе может испортить результат. Можно автоматизировать процесс настройки, запрограммировать циклы ПЦР для упрощения работы персонала лаборатории.
Для проведения ПЦР в режиме реального времени используется DNA-амплификатор, который позволяет осуществлять ПЦР и одновременно измерять изменение флуоресценции в течение реакции. При помощи построения графика зависимости флуоресценции от номера цикла, амплификатор показывает, как накапливаются продукты ПЦР со временем.
Преимущества ПЦР в режиме реального времени
- Возможность сразу отслеживать прогресс реакции ПЦР, точное измерение количества ампликона на каждом цикле реакции, что обеспечивает высокую точность при измерении исходного материала в образцах.
- Расширенный динамический диапазон обнаружения, выполнение амплификации и детекции в одной пробирке, что исключает необходимость визуализации результатов ПЦР с использованием гель-электрофореза, позволяет снизить риск контаминации продуктами ПЦР.
- Мультиплексная ПЦР также осуществляется с помощью DNA-оборудования, позволяющего одновременно амплифицировать и детектировать две или более последовательности ДНК в одной реакции, используя пробирки с разными флуорофорами.
Устройство прибора
Амплификатор с детекцией состоит из термоблока, системы термостатирования, а также блока управления.
В термоблоке устанавливаются пробирки с биологическими образцами, которые подвергаются нагреванию и охлаждению. Термоблоки бывают нескольких видов: твердотельные модели либо роторные модификации. Твердотельные агрегаты для исследований в “реальном режиме” более распространены на рынке in vitro оборудования, выпускаются многими брендами. Некоторые производители предлагают также модификации оборудования со съемными термоблоками или несколькими отсеками для образцов.
Термостатирующая система включает элементы Пельтье – специальные термоэлектрические преобразователи, а также вентилятор, радиатор. Они обеспечивают быстрое изменение температуры, а также стабильно поддерживают ее в процессе реакции. Термоболок и радиатор обычно объединены в единую конструкцию, а вентилятор располагается отдельно от них.
Блок управления является микрокомпьютером, который позволяет оператору управлять температурой, настраивать автоматическую амплификацию ДНК в соответствии с программой. Аппарат оснащается жидкокристаллическим экраном, клавиатурой для ввода данных, имея простой пользовательский интерфейс. Некоторые модели требуют подключения к лабораторному компьютеру для управления.
Амплификатор в режиме реального времени – более сложная модель, которая имеет дополнительный функционал. Оборудование оснащается специальным детектором флуоресценции и позволяет поэтапно наблюдать за ходом ПЦР. Некоторые модели дополняются калькуляторами для тонкой настройки режима температуры, а также управлением с помощью голосовых команд.
Выбор амплификатора
В каталоге Биохид есть ПЦР-амплификаторы с различными эксплуатационными характеристиками:
- Скорость изменения. Нагрев, охлаждение образцов напрямую зависят от материалов, из которых сделан термоблок аппарата, а также работы элементов Пельтье;
- Наличие температурного градиента. Эта функция позволяет быстро и тонко настраивать все параметры циклов ПЦР, ускоряя работу лабораторного персонала;
- Оснащение несколькими термоблоками. Такие модели позволяют проводить несколько исследований одновременно на разных этапах. Модификации с несколькими нагревательными элементами актуальны для лабораторий с интенсивным потоком образцов;
- Материал корпуса. Лабораторный амплификатор должен легко чиститься и дезинфицироваться, выдерживать активную эксплуатацию.
В нашем каталоге представлено оборудование различных мощностей и диапазонов температур, что позволяет выбрать наиболее подходящий вариант по цене для вашей лаборатории, конкретных исследовательских нужд. Наши аппараты обладают передовыми функциями, такими как программируемые градиенты температур, возможность использования блоков с различными размерами. Это позволяет гибко настраивать исследования и получать более точные результаты в реальном режиме .
Компания “Биохид” предоставляет профессиональную консультацию и поддержку своим клиентам. Вы можете задать вопросы относительно выбора, использования. Цена устройств по запросу.
Для всех моделей из нашего каталога действует гарантийное, постгарантийное обслуживание. Закажите прибор по выгодной стоимости на нашем сайте.